Тепла фото: D1 82 d0 b5 d0 bf d0 bb d0 be: скачать картинки, стоковые фото D1 82 d0 b5 d0 bf d0 bb d0 be в хорошем качестве

Содержание

Добавим тепла вашей фотографии


Каждый художник может черпать вдохновение из окружающих его предметов. Взять хотя бы чай. Многие не предают особое значение этому напитку. Всё потому что он доступен в повседневной жизни. Мы к нему привыкли. А что если присмотреться к заваренному напитку в прозрачном стакане. Он имеет янтарный цвет. Даже один его вид наполняет человека теплом. Стоит ли говорить о вкусе и полезных свойствах чая?


Этот теплый и приятный цвет можно использовать в обработке снимков. Скучные и холодные снимки могут заиграть теплыми притягательными тонами. Чайный цвет хорошо вписывается в снимки с большим количеством зелени или в фотографии, сделанные со смешанными источниками света.


Шаги обработки


1. Цвет кожи. Здоровье и красота


На снимке в примере цвет лица девушки грубый и землистый. Это вполне обычный цвет кожи, но он смотрится не слишком хорошо. Хотелось бы видеть лёгкость в лице девушки. При обработке следует использовать как можно больше корректирующих слоёв. Они позволяют выполнять неразрушающую коррекцию. Именно такой подход позволит в любой момент изменить параметры или вернуться к предыдущим этапам без каких-либо усилий.


Прежде всего, создадим корректирующий слой Selective Color.


2. Цифры в искусстве


Инструментарий Selective Color прост и удобен. Нам нужно выбрать цвет, который мы хотим откорректировать и при помощи настроек добавляем ему определенные цвета. Смешивание цветов приводит к появлению новых оттенков. Вот такие значения использованы в данной работе:


  • Reds: C – (-90%), M – 0%, Y – 20%, B – 0%;

  • Yellows: C — 0%, M – 0%, Y – (-0%), B – 0%;

  • Greens: C — 100%, M – (-51%), Y – 0%, B – 18%;

  • Cyans: C — 50%, M – (-30%), Y – (-70%), B – 0%;

  • Blues: C — 20%, M – 15%, Y – (—37%), B – 0%.


3. Чайный цвет деревьев


Листва слишком выделяется яркостью и пёстростью, хоть её цвет и однороден. В данном случае стоит добавить листьям осенних оттенков. Это отодвинет летнюю яркость на задний план, позволив зрителю рассмотреть лицо девушки. 


Добавляем корректирующий слой Hue/Saturation


.


Инструмент Hue/Saturation сдвигает все цвета в отличие от Selective Color. На это стоит обратить внимание. 


4. Свет и яркость


Чтобы сделать снимок более выразительным, добавим при помощи всё того же Hue/Saturation немного яркости и насыщенности.


Работаем со всеми каналами: Hue: — 0, Saturation – 15, Lightness –5.


5. Делаем чай покрепче


Не закрываем открытый корректирующий слой. Выбираем в нем зеленый канал. Чтобы увеличить зону воздействия, можно двигать ползунки внизу окна.  Вводим следующие значения: 39°/86° и 120°/172°.Hue: — (-65), Saturation – 31, Lightness –13. Переключаемся в голубой канал (Cyan). Сдвигаем маркеры 110°/140° и 201°/231°. Hue: — (-47), Saturation – (-40), Lightness –(-60).


6. Солнышко, добавь контраста


В большом контрасте могут потеряться детали, поэтому нужно балансировать на грани. Солнце неминуемо создаёт контраст, поэтому стоит поработать с корректирующим слоем Curves


.


7. Виньеточка


Дополнительный акцент поможет создать виньетирование. Нам не важно, что находится по краям кадра. Эти участки не обязательно должны быть такими же яркими, как и основной участок снимка. Для создания виньетки выделяем овал инструментом выделения и делаем растушёвку. Значение зависит от разрешения снимка. В данном случае использовано число 200 пикселей. Делаем инверсию выделения Ctrl+Shift+I и создаём корректирующий слой Curves. Опуская или поднимая центральную часть кривой можно регулировать степень виньетирования. Также на помощь может прийти размытие маски или регулировка непрозрачности корректирующего слоя.


8. Мягкий вкус


Фотография получается резковатой. Стоит сделать её помягче. Поможет фильтр Hight Pass. Применять этот фильтр нужно к негативу изображения. Сначала нужно сделать копию основного слоя. Инвертируем цвета Image/Adjustment/Invert (Ctrl+I) и обесцвечиваем (Image/Adjustment/Desaturate). Режим наложения изменяем на Overlay (Перекрытие), а слой преобразовываем в Smart Object.


9. Регулируем крепкость


К тому, что получилось применяем фильтр High Pass со значением 60. Непрозрачность слоя уменьшаем до 35.


Благодаря тому, что слой преобразован в Smart Object параметры фильтра всегда можно изменить.  


10. Тени и коричневый цвет


Добавим снимку тепла. Очень интересен инструмент Карта градиента (Gradient Map). Переведем режим наложения корректирующего слоя в Color, а непрозрачность уменьшим до 15%. Для работы понадобится стандартный градиент: Yellow, Violet, Orange, Blue


Финал


Снимок готов, но нет предела творчеству. Можно сколько угодно работать над деталями или экспериментировать с настройками. Также не помешает в финале слегка увеличить резкость.

Фото Март- хочется тепла! в Новомихайловском

Питание в отеле

Бассейн

Автостоянка

Интернет Wi-Fi

Работает круглогодично

Баня, сауна

Территория, двор

Спутник/кабель ТВ

Собственный пляж

Детская площадка

Конференц-зал

Проживание с животными

Дети любого возраста

Круглосуточная регистрация

Терминал для оплаты картой

Владивосток вновь очищали от мусора и веток – с приходом тепла субботники становятся всё более массовыми (ФОТО) – Новости Владивостока на VL.

ru

В субботу, 10 апреля, во Владивостоке убрали мусор и сломанные ветки сразу на нескольких площадках. Субботник в парке Минного городка организовали сотрудники Дирекции общественных пространств и компании «Конкрит Джангл», которая недавно представила проект благоустройства территории. Аллею Героев по улице Вострецова помогали чистить волонтёры из администрации Владивостока. В субботниках поучаствовали и жители города. По информации мэрии, всего к акции присоединились больше двух тысяч человек.

Сгребать листву, собирать ветки и мусор, подметать дорожки на Аллее Героев сотрудники администрации начали в 10:00. Волонтёров организаторы сверяли по спискам, отмечали присутствующих – собралось три управления, около сотни человек. Работать руками на благо города им пришлось в выходной день, так что некоторые пришли с детьми. Всем раздали перчатки, мешки, мётлы, грабли, лопаты. В уборке была задействована и спецтехника: погрузчик, КамАЗ, подъёмник. Обломанные ветви деревьев спиливали и отправляли в грузовик. Небольшую территорию аллеи убрали за два часа.

По большому счёту жителей микрорайона конкретно на этом субботнике не было: не увидели анонс. К волонтёрам присоединились лишь жильцы ближайших домов, которые заметили работы из окна.

«Есть проблема: здесь постоянно гуляют с собаками, но редко кто за собой убирает… Повесить бы объявление о том, что выгул собак запрещён. Либо если пришёл с собакой, то не по газонам гулять, а по дорожкам, убирать за питомцами. В прошлый раз принимала участие в субботнике в конце февраля, а в этот раз о работах не слышала. Вышла, потому что рядом живу. В свободное время тоже потихоньку собираю здесь мусор», – рассказала Любовь Максимовна, жительница дома № 9 на Вострецова.

Субботник в 10:00 начался и в парке Минного городка. Собравшиеся тоже получили мешки и перчатки. Основная работа – собрать сломанные ветви, распилить, сложить в грузовики, очистить лес от мусора. Для этого задействовали четыре КамАЗа, погрузчик, собралось около 200 человек.

Жительница Владивостока Алёна на субботник в парк приехала с Первой Речки. Она часто гуляла здесь в детстве и рада, что бесхозную территорию наконец собрались благоустроить.

«Я считаю, что убирать территорию, парки должны не только специальные службы, но и горожане, которые здесь же отдыхают. Хочется подготовить место для приятных прогулок к сезону. Сегодня мы здесь даже мешки находили с мусором, с покрышками. Уже ждём, когда эту территорию облагородят, а поработать в выходной не в тягость», – говорит Алёна.

По словам организаторов субботника (и авторов проекта благоустройства парка) из компании «Конкрит Джангл», навести порядок решили на территории Восточного леса, куда люди будут приходить в течение всего года. С Западного леса начнётся первая очередь строительства, так что уборку там проведут профессионально. Благоустройство всей территории рассчитано на 3 года, сдать новый парк должны в 2024 году. Времени немного, однако с некоторыми работами не нужно торопиться, чтобы сделать качественно, считают создатели концепции.

«В этом году будет реализована первая очередь: Западный лес и детский велотрек. Ведётся подготовка к тендеру, так как концепция уже готова. К работам планируется приступить в мае и завершить их до конца года. Детский велотрек возле озёр и Западный лес будут готовы к декабрю. Таким образом, уже можно будет посмотреть, каким парку предстоит стать в будущем, – рассказал директор компании «Конкрит Джангл» Феликс Машков. – Эти объекты выбраны для начала благоустройства не просто так: сейчас они не имеют совсем никакой инфраструктуры. Кроме того, основным элементом концепции парка является кольцевая беговая и прогулочная дорожка длиной 2,5 километра. Делая Западный лес, мы замыкаем эти важные 750 метров, которые позволяют положить основу кругового маршрута. Эта широкая дорожка также будет использоваться для обслуживания парка: там может ездить техника, так как это позволит специальное покрытие».

По информации мэрии Владивостока, 10 апреля субботник удалось организовать по многим адресам. Среди них территории в районе «Багратиона», школы № 60 на Русской, рядом с детской площадкой на проспекте 100-летия Владивостока, 84а, на Тополиной аллее (проспект Красного Знамени), Сипягина, Ялтинской, Амурской, Киевской, Героев Хасана, Вострецова, Суханова, Нерчинской, Иртышской, Сафонова, в парке Минного городка и по другим точкам. В целом специалисты администрации насчитали больше двух тысяч участников.

Напомним, «уборочная страда» во Владивостоке в этом году стартовала 6 марта, когда чиновники вышли на первый весенний субботник, в спешке организованный по поручению губернатора. Было очень холодно и ветрено, поэтому уже через пару часов люди разошлись. Большинство горожан инициативу тогда не поддержало. Спустя неделю уборкой в Покровском парке занимались работники мэрии, сотрудники муниципальных предприятий и депутаты городской Думы. Третий заход чиновники и первые лица города сделали ещё через одну неделю – 20 марта. Тогда в администрации Владивостока эту работу назвали не субботником, а скорее помощью городу в уборке веток. А 27 марта постоянные участники субботников массово переместились в парк Минного городка. Здесь же они продолжили начатое дело и 3 апреля – тогда сотрудники регионального правительства и администрации вновь вернулись в парк Минного городка.

Всем тепла!
Фото: irrvas /… — Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова

Сегодня отмечается День филолога в России 📚

В МГУ филологов обучают на нескольких факультетах: это факультет иностранных языков и регионоведения, Институт стран Азии и Африки, Институт русского языка и Культуры, Высшая школа перевода, факультет журналистики, и, конечно, флагманом является филологический факультет.

Филологическому факультету МГУ принадлежит роль лидера в университетской системе подготовки филологов в России. Здесь создаются новейшие университетские программы по всем дисциплинам филологического цикла. В состав факультета входят 23 кафедры, 6 лабораторий и 7 учебно-научных центров. Профессорско-преподавательский состав факультета включает более 100 докторов и около 230 кандидатов наук. В числе преподавателей — академики и члены-корреспонденты российских и зарубежных Академий Наук. Филологический факультет имеет блистательное прошлое. Здесь учились Д.И. Фонвизин, А.С. Грибоедов, М.Ю. Лермонтов, В.Г. Белинский, А.И. Герцен, И.А. Гончаров и другие корифеи отечественной литературы. Сегодня факультет гарантирует многостороннее и уникальное образование, которое позволяет филологу быть востребованным в любой экономической ситуации. Здесь готовят лингвистов, переводчиков и литературоведов высокой квалификации, знающих несколько современных иностранных языков, знакомых с классическими языками, свободно ориентирующихся в отечественной и зарубежной литературе, обладающих навыками компьютерного макетирования и редактирования. Филологический факультет МГУ — это сочетание новейших достижений лингвистики и литературоведения с классическими принципами гуманитарного образования.
В Московском университете сложились свои традиции празднования — День филолога МГУ празднуют в первую пятницу декабря с 1992 г. Эту традиция была положена деканом факультета М.Л. Ремнёвой.

Поздравляем всех филологов с праздником 🎉

📸 посвящение первокурсников в студенты филологического факультета

30+ редких фото знаменитостей, которые полны простоты и душевного тепла

Ни одна знаменитость не обходится без целого арсенала фотографий с красных дорожек и обложек журналов, где предстает во всей красе. Но у каждого известного человека есть и другая сторона жизни, которая остается за кадром для папарацци и фанатов. Рок-музыканты, светские львицы и лица популярных ситкомов тоже хранят в пыльных альбомах карточки, от которых на душе делается теплее.

Мы в AdMe.ru с удовольствием изучили звездные архивы и почувствовали себя немного ближе к кумирам миллионов. В нашей сегодняшней подборке — кадры, на которых певцы, актеры, режиссеры и другие успешные люди так похожи на нас.

1. Арнольд Шварценеггер с сыном Патриком и Клинт Иствуд с дочерью Франческой, 1993 год

2.

Шакира в 1990 году

3. Ким Кардашьян со своими сестрами Хлои и Кортни, 1980-е

4. Леонард Нимой с сыном на съемках «Звездного пути», 1960-е

5. Вин Дизель и Мишель Родригес, 2001 год

6. Илон Маск с братом и мамой, 1992 год

7. Виктория Бекхэм в детстве, 1970-е

8. Эминем празднует 18-летие, 1990 год

9. Кортни Кокс на мотоцикле, 1987 год

10. Съемочная группа «Криминального чтива», 1993 год

11. Камерон Диас в группе поддержки, 1988 год

12. Фредди Меркьюри в 1990 году

13. Мадонна и Жан-Поль Готье, 90-е

14. Оззи Осборн в 1975 году

15. Анджелина Джоли в 1990 году

16. Бритни Спирс и Кристина Агилера на съемках «Клуба Микки Мауса», 1994 год

17. Ариана Гранде в детстве, 1990-е

18. Кайли и Кендалл Дженнер в школе, 2000-е

19. Николь Кидман с дочерью Маргарет, 2010 год

20.

Съемочная группа «Друзей», 2004 год

21. Энрике Иглесиас (слева) с братом Хулио и друзьями, 1980-е

22. Майли Сайрус и братья Джонас, 2008 год

23. Джессика Бил на одной из своих первых фотосессий, 1990-е

24. Селена Гомес готовится отмечать Хеллоуин, 2000 год

25. Мэттью Макконахи в детстве, 1969 год

26. Риз Уизерспун, 1990-е

27. Мэттью Перри и Лиза Кудроу, 1990-е

28. Крис Хемсворт с мамой, 1980-е

29. Ева Мендес отмечает Рождество, 1990-е

30. Джастин Бибер, 2000-е

31. Дженнифер Энистон с отцом, 1970-е

Каких знаменитостей из подборки вы бы не узнали, если бы не подписи?

Отель Тепло, Абинск – цены гостиницы, отзывы, фото, номера, контакты

В какое время заезд и выезд в Отеле «Тепло»?

Заезд в Отель «Тепло» возможен после 14:00, а выезд необходимо осуществить до 12:00.

Сколько стоит проживание в Отеле «Тепло»?

Цены на проживание в Отеле «Тепло» будут зависеть от условий поиска: даты поездки, количество гостей, тарифы.

Чтобы увидеть цены, введите нужные даты.

Какие способы оплаты проживания предусмотрены в отеле?

Способы и сроки частичной или полной предоплаты зависят от условий выбранного тарифа. Отель «Тепло» принимает следующие варианты оплаты: Visa, Euro/Mastercard, Maestro, American Express.

Есть ли скидки на проживание в номерах «Тепло»?

Да, Отель «Тепло» предоставляет скидки и спецпредложения. Чтобы увидеть актуальные предложения, введите даты поездки.

Какой общий номерной фонд у Отеля «Тепло»?

В Отеле «Тепло» 10 номеров.

Как можно добраться до «Тепло» от ближайшего аэропорта и ж/д вокзала?

от ж/д вокзала: от ж/д вокзала по ул. Вокзальной дойти до Комсомольского пер. Далее, по пр. Комсомольскому пройти 1,8 км до отеля «Тепло».

Какие категории номеров есть в Отеле «Тепло»?

Для бронирования доступны следующие категории номеров:
Двухместный (Стандарт)
Двухместный (Комфорт)
Двухместный (Двухместный номер с 1 кроватью или 2 отдельными кроватями)
Двухместный (Двухместный номер Делюкс с 1 кроватью или 2 отдельными кроватями)
Двухместный (Улучшенный двухместный номер с 1 кроватью или 2 отдельными кроватями)
Люкс
Сьюит (Стандартный люкс)

Чем заняться детям на территории «Тепло» в свободное время?

В Отеле «Тепло» предусмотрены следующие услуги для маленьких детей. Внимание! За услуги может взиматься дополнительная оплата.
Детские телеканалы
Игровая комната
Детское меню

Отель «Тепло» предоставляет услугу парковки?

Да, в Отеле «Тепло» предусмотрена услуга парковки вашего автомобиля. Пожалуйста, перед бронированием уточните возможную дополнительную оплату и условия стоянки.

В Отеле «Тепло» есть ресторан или кафе?

В Отеле «Тепло» есть ресторан.

В Гидрометцентре спрогнозировали аномальное тепло в России :: Общество :: РБК

Фото: Константин Кокошкин / Global look Press

На этой неделе температура превысит климатическую норму в центре Европейской России, также аномальное тепло придет в Приволжский федеральный округ, на Урал и в Сибирь. Об этом сообщил «РИА Новости» научный руководитель Гидрометцентра Роман Вильфанд.

По его словам, в течение всей недели в Центральном федеральном округе ожидается от 19 до 25 градусов.

«Понятно, что это летняя погода. Такая температура, конечно, выше нормы <…> В Москве 11 мая — примерно на два градуса, 12 мая — уже на три градуса, 13, 14, 15 — на 4,5 градуса выше нормы», — сказал Вильфанд.

Вильфанд сообщил о позволяющей отключать отопление погоде в Москве

Он добавил, что в некоторых областях Северо-Западного федерального округа в начале недели из-за особенностей перемещения воздушных масс будет даже теплее, чем в центре Европейской России. Так, в Новгородской, Ленинградской, Вологодской и Калининградской областях температура будет выше, чем в Москве. Температуры в этих регионах составят 21–25 градусов.

Как тепло влияет на ваш объектив и искажает ваши фотографии

Если вы используете длиннофокусный объектив, вы можете не подозревать, что съемка в жаркий день может снизить качество ваших изображений. Заинтригованы? Тепло может вызвать искажение изображения. В этом видео Стив Перри объясняет эту проблему фотографам пейзажей и дикой природы:

Возможно, у вас уже были проблемы с объективом в жаркие дни. В ситуациях, когда ваша камера смотрит на участок земли, который подвергается воздействию солнца, результатом часто становится мерцающий вид через объектив, искаженные пропорции и запутанная система автофокусировки, из-за которой трудно заблокировать фокус.

Волны тепла вызываются солнцем, нагревающим поверхность.

Когда солнце падает на открытую поверхность — землю, воду, капот вашего джипа, что угодно — образующееся тепло передается с поверхности в окружающий воздух. В свою очередь, воздух нагревается и поднимается, вызывая опускание более холодного воздуха. Разница между плотностью холодного и горячего воздуха создает эффект мерцания. Это даже не обязательно должен быть исключительно теплый день. Это может произойти где угодно и в любой месяц.Перри приводит пример, когда он сфотографировал медведя гризли, когда температура была выше 20 градусов; изображение все еще было затронуто.

На этом снимке показано, как тепловые волны могут сделать ваши изображения «мягкими».

Проблемы с плохим качеством изображения и сложностью фиксации фокуса имеют тенденцию усугубляться, когда вы снимаете объекты на больших расстояниях. Другими словами, более длинные линзы сжимают тепловую волну между вами и объектом. В результате получаются очень мягкие изображения.

Хотя горячий воздух может быть проблемой для любого объектива, вы с большей вероятностью столкнетесь с проблемами, если используете объектив, диаметр которого составляет от 150 до 200 мм или больше.

Решение

Вот несколько советов, которыми Перри делится для решения проблем, связанных с нагревом ваших фотографий:

  • Измените свое положение на такое место, где тепло не исходит от поверхности в такой степени.
  • Снимайте как можно ближе к объекту.
  • Снимайте при свете раннего утра и ближе к вечеру, когда меньше шансов встретить волны тепла.
  • Съемка в пасмурные дни.

Горячий капот автомобиля выделяет много тепла, создавая тепловую волну и искажая изображения.

  • Не стреляйте в солнечный день через капот автомобиля!

«Простое осознание того, что проблема существует, позволило мне регулярно ее избегать».

Перчатки для фотографов: перчатки №1 для фотографов

В чем разница между хорошими перчатками для фотографии и каким комбинациям перчаток доверяют лучшие фотографы?

Холодные руки и жесткие пальцы — известная проблема уличных фотографов

Вы полностью настроены фотографировать на морозе.Даже на улице вы хотите иметь максимальный контроль над камерой и ее настройками. Вы все время выскакиваете из перчаток — вскоре у вас начинают мерзнуть руки и пальцы. Даже в ваших толстых перчатках они снова не согреются, и все, что вам нужно, — это выйти и снова зайти внутрь. Вы рады, что картина находится в коробке, но не совсем удовлетворены. Вернувшись домой, вы разочарованы результатом, думая о том, что могло бы получиться при более лучшем оборудовании.

«При правильной настройке вы можете полностью сосредоточиться на съемке»

Опыт профессионалов

Не оставляйте дело на волю случая, когда дело доходит до покупки перчаток для фотографий.Мы в THE HEAT COMPANY работаем с профессиональными фотографами в качестве партнеров и послов, которые используют наши перчатки в самых холодных местах на земле. В постоянном обмене мы постоянно развиваем их вместе. Следовательно, у наших перчаток уже есть большой опыт. Со временем появилась сложная система перчаток. РАЗРАБОТАНА СИСТЕМА ТЕПЛОВОГО СЛОЯ.

От спецподразделения до фотоперчаток

Изначально мы создавали перчатки специально для спецназа. Задача заключалась в создании перчаток, которые позволяли бы бережно обращаться с ними и в то же время были очень теплыми.Фотографы быстро открыли для себя перчатки. Между тем, наши перчатки стали незаменимым снаряжением для фотопутешествий с юга Патагонии через Исландию и Лофотенские острова на Шпицберген и Сибирь.

Тепло с системой

Постоянно меняющиеся, часто непредсказуемые условия требуют гибкого и адаптируемого оборудования. Мы в THE HEAT COMPANY энтузиасты активного отдыха и поставили перед собой задачу разработать не только самые теплые, но и самые функциональные перчатки с высочайшими стандартами качества.

HEAT LAYER SYSTEM — это трехслойная система перчаток с множеством возможных комбинаций. Это решение для самых разных требований и индивидуальных потребностей.

1-й слой — ЛАЙНЕР

LINERS — это тонкие нижние перчатки, которые позволяют удобно обращаться с камерой, не снимая их. Все ЛАЙНЕРЫ имеют сенсорные материалы на кончиках пальцев — подходят для сенсорных дисплеев всех производителей. В зависимости от ваших личных предпочтений вы можете выбирать из разных моделей для разных температур и требований.ЛАЙНЕРЫ можно носить отдельно или под ОБОЛОЧКОЙ (2-й слой).

2-й слой — ОБОЛОЧКА

SHELL — это очень теплая рукавица, которую можно носить поверх наших перчаток LINER. Вы можете легко расстегнуть варежки с помощью молнии на ладони и при необходимости откинуть клапан варежки. Таким образом, вы сможете делать снимки в ЛАЙНЕРЕ, не снимая рукавицы. SHELL также доступен в особенно теплой полностью кожаной версии SHELL FULL LEATHER.

3-й слой — ВЫТЯЖКА

Самый внешний слой СИСТЕМЫ ТЕПЛОВОГО СЛОЯ используется в экстремальных условиях.POLAR HOOD — это тонкий и очень легкий чехол для рукавиц. Вы можете просто свернуть его и положить в сумку для фотографий. Он предлагает дополнительную защиту от ветра и влаги, и вы можете комбинировать его со всеми моделями перчаток системы HEAT LAYER SYSTEM. Во время ливневого дождя POLAR HOOD может пригодиться прямо над ЛАЙНЕРОМ.

SMART в сочетании!

Некоторые фотографы предпочитают практичное комплексное решение: в моделях HEAT 3 SMART и HEAT 3 SMART PRO нижняя перчатка (LINER) и рукавица (SHELL) уже прочно сшиты вместе.Вы также можете носить пальто варежку (POLAR HOOD) в качестве внешнего слоя против ветра и непогоды с этими моделями.

Вы предпочитаете прямой контакт с камерой?

Наши модели HEAT 2 созданы для тех, кто предпочитает перчатки без пальцев при съемке. При необходимости можно просто откинуть шапочку варежки на пальцы. Идеально подходит для межсезонья и слегка минусовых температур. Вы можете комбинировать перчатки HEAT 2 с LINER MERINO LINER и POLAR HOOD.

Умные детали

  • Скрытые магниты: Клапан варежки и большой палец можно откинуть назад и легко застегнуть, так что вы можете без ограничений обращаться с камерой.
  • Материалы, чувствительные к сенсорному экрану: Управляйте телефоном и камерой, не снимая перчаток.
  • Дополнительный карман на тыльной стороне руки: для грелок или небольшого фотооборудования, такого как карта памяти
  • Полезные петли-фиксаторы и карабины: Вы можете соединить все слои вместе, чтобы ни одна деталь не потерялась при съемке.
  • Удлиненная манжета на запястье: против тепловых мостов
  • 2 шнурка для оптимальной посадки, а также защиты от сырости и снега
  • Практическое приспособление для вытягивания: Петли на боковой стороне рукавицы или между пальцами облегчают ее снятие.
  • Интеллектуальное использование материала: Обеспечивает оптимальные характеристики, так что вы можете полностью сосредоточиться на съемке.
  • Силиконовый принт на ладони: При замене объектива крепко держите его.

Высоко востребован среди профессионалов

В течение многих лет профессиональные фотографы со всего мира полагались на перчатки для фотосъемки от THE HEAT COMPANY в своих приключениях:

Роберто Мойола фотограф и основатель clickalps.com

Роберто Мойола — итальянский фотограф и основатель фотоагентства clickalps.com. Со своими фото-курсами и мастер-классами он путешествует по всему миру, чтобы открывать новые места с помощью своей камеры.Вот почему для него очень важна гибкая система перчаток — он носит с собой WIND PRO LINER и SHELL в качестве второго слоя в каждой поездке.

Проверено годами в наших фотоэкспедициях

— Роберто Мойола

© Роберто Мойола, Лофотенские острова, 2019


Стэнли Леру — отмеченный наградами фотограф

Фотографии парижского фотографа Стэнли Леру уже были представлены на многочисленных выставках по всему миру.Как один из лучших фотографов дикой природы, он полагается на систему HEAT LAYER SYSTEM в своих фототурах, чтобы подготовиться к любой погоде.

Система слоев очень гибкая

— Стэнли Леру

© Стэнли Леру, Антарктида


Флориан Смит — фотограф и искатель приключений

После завершения обучения фотографу в 2015 году Флориан Смит работал внештатным фотографом-натуралистом. В своих путешествиях он всегда находится в поисках приключений, адреналина и дикой природы.В этих экстремальных условиях он доверяет своей любимой комбинации POLARTEC LINER + SHELL.

Лучшие перчатки в холодную погоду

— Флориан Смит

© Флориан Смит


Неужели тепловые волны портят качество вашего изображения?

Вы когда-нибудь смотрели на изображения, сделанные телеобъективом в прекрасный полдень, и задавались вопросом, почему они нечеткие?
Когда я писал этот совет, я оценивал несколько длиннофокусных объективов, у которых есть общие черты с другими телеобъективами.Вы когда-нибудь видели мерцание вдали, например, там, где дорога идет через холм?
Фокусные расстояния телефото увеличивают эти тепловые волны, и искажающий эффект с большей вероятностью отрицательно повлияет на большие расстояния до объекта.

Если между вами и вашим объектом (или ниже линии обзора) есть источник тепла (относительно температуры окружающей среды), вы можете ожидать некоторого воздействия тепловой волны даже на относительно коротких расстояниях до объекта.
Волны тепла могут возникать практически где угодно, но эта проблема в основном возникает на открытом воздухе, и солнце является основной (но не единственной) причиной.Я часто вижу деградацию, вызванную волнами тепла на спортивных площадках с искусственным покрытием, поверхностях беговых дорожек и даже на густой зеленой траве во дворе дома.
Асфальт, имеющий темный цвет и обладающий высокой способностью поглощать / удерживать тепло, является классическим источником тепловых волн, включая источник в моем примере «дорога идет через холм».

Существует множество других источников волн тепла, в том числе текущая река в холодный день:

Вышеупомянутое изображение является 100% кадром из 600-миллиметрового изображения стального железнодорожного моста.Нет, я не использовал «Художественный» фильтр для этого изображения.
Да, сталь должна быть прямой и острой.
Нет, это расплывчатое изображение не по вине объектива.

Когда он присутствует, мерцание тепла создает оптическое искажение, которое ухудшает качество фотографий со среднего и большого расстояния.
Ясным солнечным утром было 13 ° F (-11 ° C), когда я сфотографировал отдаленный железнодорожный мост.
Более теплая вода в реке, над которой я снимал, создавала турбулентность для световых волн, достигающих объектива.

Знайте, что тепловые волны не ограничиваются воздействием только на объекты, находящиеся на большом расстоянии.
Во время тестирования объектива на 600 мм в солнечный полдень сильное увеличение фокусного расстояния позволило легко увидеть микродискажения тепловых волн на густой зеленой траве с расстояния до объекта всего около 100 футов (30 м).

Луна является обычным объектом фотографии для телеобъективов, и фотографирование Луны означает, что свет должен полностью проходить через атмосферу Земли.
Это расстояние оставляет много возможностей для отклонения света.

Волны жары определенно являются препятствием для точного сравнения объективов на открытом воздухе.
Как правило, чистое небо необходимо для постоянного освещения между снимками, и, конечно же, солнце должно быть как минимум относительно высоко в небе.
Это означает, что солнце будет нагревать все, на что оно светит.

Обратите внимание, что тепловые волны также могут негативно повлиять на производительность автофокусировки.
Поскольку оптические неоднородности, вызванные тепловыми волнами, поступают в систему (системы) автофокусировки камеры (системы обнаружения фазы и обнаружения контраста), это может повлиять на расчет фокусного расстояния.Особенно имейте это в виду при наборе микронастройки автофокуса.

Что вы можете сделать с этой проблемой?
Тепловые волны — это фактор качества изображения, на который обычно нельзя тратить деньги.
Например, более резкий объектив и лучшая камера не помогут.
Выбор другого места, другого времени суток и / или полностью другого дня или даже другого времени года часто является лучшим решением.
Пасмурный день с небольшими колебаниями температуры может подойти вашему изображению.

Часто фотограф не может контролировать день и время съемки, и ему нужно будет решить эту проблему.
Спортивные фотографы обычно попадают в эту группу.
Например, автогонки часто проходят в середине дня на асфальтовых трассах, и фотографы, снимающие эти события, сталкиваются с этим искажением.

Если вы решили стрелять сквозь волны жары, подойдите ближе, если это возможно (но это не опасно — ссылаясь на сценарий автогонок).Чем меньше воздуха проходит через свет, тем меньше вероятность того, что тепловые волны вызовут сильное искажение.
Кроме того, сделайте много снимков, чтобы позволить выбрать наименее подверженные влиянию и дать вашей камере возможность зафиксировать правильные расстояния автофокусировки.

Как тепловые волны влияют на фотографию Сводка

Резюме короткое. Причина, по которой некоторые из ваших телеобъективов нечеткие, заключается в том, что тепловые волны искажают свет и сбивают с толку систему автофокусировки вашей камеры.
Основной урок здесь заключается в том, что использование длинных фокусных расстояний для фотографирования удаленных (а иногда и не очень далеких) объектов должно производиться с учетом воздействия тепловых волн.

Защита старых фотографий от жары и влажности в Хьюстоне

Аааа. Веселье на солнце. Если вы переехали в Хьюстон откуда-то с севера, держу пари, вы ожидали прекрасной теплой погоды, верно? А что у тебя получилось? Сильная жара, которая заставляет вас принимать душ каждый раз, когда вы находитесь на улице дольше двух-трех минут. Здесь безумно жарко. Все это знают. А теперь подумайте о своих бедных старых фотографиях!

Хранение старых фотографий в удручающей хьюстонской жаре

Оживление воспоминаний через старинные фотографии может быть большим удовольствием для всей вашей семьи, но если вы хотите, чтобы эти фотографии пережили погоду в Хьюстоне, то стоит знать кое-что плохое. чтобы остановить их заранее.Держитесь подальше от чрезмерных температур, выбирайте правильный материал альбома, пишите фотографии индивидуально, когда это возможно, правильно снимайте и воспроизводите.

Фотографии отражают старые воспоминания. Их хранение — хороший способ сохранить драгоценные моменты в ближайшее время. Однако, как бы сильно вы ни старались, вы не можете избежать возможности их ухудшения. По крайней мере, что вы можете сделать, чтобы спланировать свою жизнь, сказав несколько шагов.

Храните фотографии вдали от жары и влажности Хьюстона, или в противном случае.

В любом случае, фотографии следует хранить в месте, где температура не слишком низкая или слишком холодная. ВНИМАНИЕ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!Я вспоминаю, как впервые нашла коробки с винтажными фотографиями на чердаке родителей. Я никогда их раньше не видел, поэтому могу только предположить, что они были там не менее 20 лет.

Старые черно-белые 1920-1950-х годов все еще были в приличной форме (серьезно, тогда они просто улучшали вещи). К сожалению, принты «Fox Photo» и Polaroid 1970-1980-х годов не имели такого успеха.

Эти текстурированные отпечатки лисы были размазаны, а из-за тепла масло от отпечатков пальцев «ползло» по фотографии, вызывая серьезные цветовые искажения.Полароиды просто наполовину расплавились и слиплись. ДОБРО ПОЖАЛОВАТЬ В ХЬЮСТОН!

Природные участники могут разрушать изображения из-за химического воздействия. Не храните их на чердаке, в гараже, на складе или в любом другом месте с аналогичными погодными условиями, так как влажность считается вероятной для ухудшения состояния.

Защитные бескислотные фотоальбомы

В связи с любыми другими способами, в альбомах изменен выбор во многих отношениях.Встреча с альбомом необычна. Однако не все записи сделаны всегда или не очень качественно.

Помните альбомы с тонкими «липкими линиями» за листом прозрачного пластика? Это действительно хорошо сработало для мамы, бабушки и их потребности в организации. Жаль для нашего поколения — этот клей разъедает обратную сторону фотографий и становится не отличным от цемента при хранении на красивом чердаке с температурой 150 градусов в течение 20 лет. Попробуйте новые альбомы с магнитным способом / отклеиванием. Если похоже, что в нем может быть клей, не покупайте его.

Кроме того, не покупайте фотоальбомы в W * -Mart или любой другой сети аптек и ожидайте, что они выдержат испытание временем. Потратьте немного времени на поиск и воспользуйтесь преимуществами обширных сетей!

На Amazon есть много продавцов с очень качественными фотоальбомами, которые прослужат намного дольше вашей жизни. Сделайте одолжение своим будущим потомкам … Оставьте то, что не потребует услуг такого художника-реставратора, как я.

Защитите фотографии по отдельности, используя полиэтиленовые пакеты и салфетки.

Еще один хороший способ оставить старые фотографии — писать их каждый день, используя сумку для сэндвичей с застежкой-молнией.Немного надуйте, чтобы поверхность не попадала на поверхность. Пространства, которое он предоставляет, достаточно для того, чтобы можно было отремонтировать, и будет сделано больше для ремонта. Если вы хотите выйти за рамки этого и убедиться, что поверхность фотографии никогда не касается пластика, бегите и купите немного папиросной бумаги, которая обычно используется для упаковки подарочных пакетов во время праздников.

Просто вырежьте по две части для каждой фотографии — одну для лицевой стороны и одну для обратной. Престо! Ваша фотография покрыта отличным защитным материалом и может быть помещена в сумку или (при необходимости) сложена стопкой.

Frаmе Photos Правильно — та кислая бумага? Во влажном Хьюстоне еще хуже!

Поместить фотографию в рамку — не всегда хорошая идея. Это связано с тем, что некоторые из используемых материалов, таких как дерево и металлы, могут причинить почти вред. Таким образом, если вы решите пойти на выход, убедитесь, что вы выберете заготовку и задний план, чтобы избежать наклеивания изображения на одном из участков. Бескислотные коврики не дорогие. Ваш местный магазин для хобби должен указать вам правильное направление.Если вы потратили деньги на реставрацию фотографий, вы, вероятно, получили отпечаток на бескислотной бумаге.

Не бери это и клади за ним лист обычной бумаги. Бумага, которая идет в комплекте с большинством рамок, НЕ является бескислотной. Вы сэкономите много душевных страданий, если получите один-единственный лист хорошего материала, чтобы защитить свои драгоценные воспоминания от повреждений.

Воспроизвести эти фотографии в цифровом виде

Как мы знаем, износ всегда будет происходить с течением времени. Таким образом, важно создать копию вашего изображения, чтобы убедиться, что в следующем генерации все равно будет что-то, что нужно посмотреть.Вы можете спросить и ответить на этот вопрос, потому что повторение всегда возможно, когда вы хотите.

Если вы хотите улучшить качество своих фотографий, убедитесь, что вам уделяется особое внимание. Избегайте использования клинков, резиновых лент, тэпа и другого небольшого материала, если вы хотите использовать свои фото группы. Никогда не покупайте и не выкладывайте свои фотографии, если вы хотите, чтобы эти части стоимости были составлены для того, чтобы остаться в живых. Тем не менее, если уже слишком поздно, а ваши фотографии уже повреждены, у нас есть исправление. Ретушь фотографий — отличное решение, и несколько доверенных семейных предприятий в Хьюстоне предлагают эти услуги (в том числе и ваш покорный слуга).

С помощью техники ретушь и восстановление старинного фото стало удобным и эффективным.

У вас есть вопросы о защите ваших фотографий от жары и непогоды?

Этот магазин по реставрации фотографий в Хьюстоне будет рад помочь! Просто позвоните нам по телефону 281-948-5870 или щелкните здесь, чтобы перейти на нашу страницу контактов.

Вы можете загрузить отсканированные копии ваших изображений, и мы ответим вам с предложением.

Наслаждайтесь остатком лета!

Новая утечка майки с письмом о выкупе в Майами Хит (фото)

В эту эпоху, когда команды НБА ежегодно носят новые запасные части, Хит установила золотой стандарт своей формой «Майами Вайс».

Каждая версия пользовалась большой популярностью. Белый, черный, фуксия, синий и совсем недавно градиентный вид.

Но Heat отказалась от этого стиля.

Что ждет Майами дальше?

Игорь Коэльо (который был осведомлен об утечках информации о футболках НБА):

🚨 ВАЗОУ!

Aqui está a primeira imagem de uma das camisas alternativas que o MIAMI HEAT vai utilizar na próxima temporada.

Ela reúne elementos de uniformes utilizados em diferentes eras da franquia.Letras e números differentes entre si, mas que contam uma história. pic.twitter.com/PXeaaNvW4G

— Camisas da NBA (@camisasdanba) 24 мая 2021 г.

Летняя одежда для жителей Майами Флориды. O primeiro I tem o estilo do uniforme original do Heat. Лето A e o segundo I têm o estilo do uniforme atual, enquanto o M foi adapado do fenomenal City Edition de 2018-19.

Com algumas sutis variações de cores, o esquema é esse: pic.twitter.com/85wv5XYvSV

— Camisas da NBA (@camisasdanba) 24 мая 2021 г.

Uma versão bem alternativa da primeira letra I apareceu nesse uniforme da temporada 2015-16.

Ele é pouco релевант. Prefiro crer que a inspiração está mesmo no primeiro uniforme da franquia. pic.twitter.com/pbGUZDhagD

— Camisas da NBA (@camisasdanba) 24 мая 2021 г.

Ah, e os números, eu achei muito ousado números diferentes entre si. Pelo menos neste modelo eu gosto do resultado.

Пример создания традиционной униформы для Heat e o segundo também foi adapado do City Ed. 2018-19. pic.twitter.com/ifusM9td1x

— Camisas da NBA (@camisasdanba) 24 мая 2021 г.

The Heat были на другом уровне, чем Cavaliers как франшизы.

Тем не менее, Майами теперь следует стилю письма с требованием выкупа Кливленда. Блех.

Эти трикотажные изделия Heat являются новинкой, и их основная цель — увеличить продажи. Но этот сложный вид не передает ни престижа, ни гламура, достойного такой франшизы, как Майами.

Лос-Анджелес Лейкерс против Майами Хит фотогалерея

Леброн Джеймс и Лос-Анджелес Лейкерс открыли финал НБА 2020 года решительным заявлением против Майами Хит.

После медленного старта и отставания на 13 очков в начале игры, «Лейкерс» добились больших успехов в конце первой четверти и никогда не оглядывались на победу со счетом 116-98 в среду вечером в игре 1 на AdventHealth Arena в г. Озеро Буэна-Виста, Флорида.

Леброн Джеймс записал для «Лейкерс» 25 очков, 13 подборов и девять передач. Джеймс стремится к четвертому чемпионству НБА в своей карьере. «Лейкерс» преследуют 17-й титул в истории франшизы — и 12-й с тех пор, как франшиза переехала в Лос-Анджелес в 1960 году.

Прокрутите вниз, чтобы просмотреть наши любимые изображения из заставки серии.

Арена AdventHealth

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Лос-Анджелес Лейкерс и Майами Хит преклоняют колени во время…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Лос-Анджелес Лейкерс и Майами Хит встают на колени во время исполнения государственного гимна перед первой игрой финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Лос-Анджелес Лейкерс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Лос-Анджелес Лейкерс преклоняют колени во время исполнения государственного гимна перед…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Лос-Анджелес Лейкерс преклоняют колени во время исполнения государственного гимна перед игрой Miami Heat в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) бьет по мячу…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) бросает мяч в ворота нападающего «Майами Хит» Бама Адебайо (13) в первой четверти первого матча финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Кентавиус Колдуэлл-Поуп

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Лос-Анджелес Лейкерс Кентавиус Колдуэлл-Поуп (1) реагирует на…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Лос-Анджелес Лейкерс Кентавиус Колдуэлл-Поуп (1) реагирует на трехочковую корзину в первой четверти против Майами Хит в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) владеет мячом…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) обрабатывает мяч против защитника «Майами Хит» Дункана Робинсона (55) в первой четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Дуайт Ховард

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Центровой «Лос-Анджелес Лейкерс» Дуайт Ховард (39) выигрывает дебют…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Центровой «Лос-Анджелес Лейкерс» Дуайт Ховард (39) выигрывает первый матч против «Майами Хит» в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Эрик Споэльстра

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Главный тренер «Майами Хит» Эрик Споэлстра реагирует на первые…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Главный тренер Майами Хит Эрик Споэлстра реагирует в первой четверти против Лос-Анджелес Лейкерс в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Тайлер Херро

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Майами Хит Тайлер Херро (14) делает пас против…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Майами Хит Тайлер Херро (14) делает пас против форварда Лос-Анджелес Лейкерс Энтони Дэвиса (3) в первой четверти первого матча финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Раджон Рондо

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник «Лос-Анджелес Лейкерс» Раджон Рондо (9) делает пас…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Лос-Анджелес Лейкерс Раджон Рондо (9) передает мяч защитнику Майами Хит Горан Драгич (7) во второй четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) и Майами Хит…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) и нападающий «Майами Хит» Джэ Краудер (99) пытаются отобрать мяч во второй четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Энтони Дэвис

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Энтони Дэвис (3) делает пас…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий « Лос-Анджелес Лейкерс » Энтони Дэвис (3) делает пас против нападающего « Майами Хит » Джея Краудера (99) во второй четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) выезжает на…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий « Лос-Анджелес Лейкерс » Леброн Джеймс (23) сбивает корзину с защитником Майами Хит Дунканом Робинсоном (55) в первом матче финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс и Энтони Дэвис

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Энтони Дэвис (3) празднует с нападающим…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Энтони Дэвис (3) празднует с нападающим Леброном Джеймсом (23) после игры в третьей четверти против «Майами Хит» в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) приносит мяч…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) выводит мяч на площадку против нападающего «Майами Хит» Бама Адебайо (13) в третьей четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Дуайт Ховард

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Центровой «Лос-Анджелес Лейкерс» Дуайт Ховард (39) делает пас…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Центровой «Лос-Анджелес Лейкерс» Дуайт Ховард (39) передает мяч нападающему «Майами Хит» Джимми Батлеру (22) в третьей четверти первого матча финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) делает пас…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий « Лос-Анджелес Лейкерс » Леброн Джеймс (23) делает пас против нападающего « Майами Хит » Бама Адебайо (13) в третьей четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) владеет мячом…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Нападающий «Лос-Анджелес Лейкерс» Леброн Джеймс (23) играет с мячом в первой четверти против «Майами Хит» в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Леброн Джеймс и Рэджон Рондо

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Лос-Анджелес Лейкерс Район Рондо (9) реагирует на…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Лос-Анджелес Лейкерс Раджон Рондо (9) реагирует на явную травму в третьей четверти против команды Майами Хит в первой игре финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena. Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Раджон Рондо

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник Лос-Анджелес Лейкерс Раджон Рондо (9) выезжает на…

30 сентября 2020 г .; Орландо, Флорида, США; Защитник « Лос-Анджелес Лейкерс » Раджон Рондо (9) направляется в корзину против нападающего « Майами Хит » Джея Краудера (99) и нападающего Джимми Батлера (22) в четвертой четверти первой игры финала НБА 2020 года на AdventHealth Arena.Обязательный кредит: Kim Klement-USA TODAY Sports

Самособирающаяся органическая наномедицина обеспечивает сверхстабильную тераностику, преобразующую фото в тепло, во втором биологическом окне ближнего инфракрасного диапазона

Изготовление и определение характеристик нано-BFF создание наномедицины, поглощающей NIR-II, благодаря ее простым и недорогим способам синтеза, а также привлекательным характеристикам, таким как уникальные спектроскопические свойства, высокий коэффициент поглощения и внутренняя химическая и фотохимическая стабильность.Кроме того, он демонстрирует большой потенциал в широком спектре приложений, включая молекулярные зонды, агенты клеточной визуализации и фотосенсибилизаторы

39,40 . Подробный синтетический маршрут BFF был проиллюстрирован в дополнительной информации (раздел S1). Идентичность и чистота промежуточных продуктов и конечного продукта были полностью проверены (дополнительные рисунки 1–7). Чтобы использовать BFF в качестве универсального тераностического агента in vivo в биологическом окне NIR-II, биосовместимые наночастицы Nano-BFF были сконструированы путем сборки красителя BFF с амфифильным биосовместимым полимером F127.После агрегации Nano-BFF проявляет выраженный батохромный сдвиг в спектральную область NIR-II по сравнению с поглощением отдельного красителя BFF в области NIR-I, что наделяет Nano-BFF фототераностическим потенциалом при лечении глубоко расположенных опухолей. при облучении лазером NIR-II (рис. 1).

Рис. 1: Схематическая конструкция Nano-BFF и его тераностическое применение.

a Схематическое изображение самостоятельной сборки Nano-BFF. b , c Его специфическое тераностическое применение при фотонной гипертермии глубоких тканей под контролем ПА в биологическом окне NIR-II.

Морфология Nano-BFF была подтверждена просвечивающей электронной микроскопией, выявляя монодисперсную сферическую морфологию со средним размером ~ 140 нм (дополнительный рис. 8a). Гидродинамические диаметры Nano-BFF были определены как 161, 193 и 166 нм в среде H 2 O, модифицированной Дульбекко среде Игла и фосфатном буферном растворе (PBS) с помощью измерений динамического светорассеяния (DLS), соответственно. , демонстрируя присутствие отдельных наночастиц Nano-BFF в водном растворе (дополнительный рис.8б). Примечательно, что Nano-BFF демонстрирует широкое поглощение в биологическом окне NIR-II в диапазоне от 900 нм до 1200 нм по сравнению с таковым у красителя BFF в области NIR-I (дополнительный рис. 8c). Кроме того, рассчитанный молярный коэффициент экстинкции Nano-BFF при 808 нм и 1064 нм составил 3,07 × 10 5 и 2,22 × 10 5 M -1 см -1 соответственно, что было сопоставимо или выше, чем у ICG (2,16 × 10 5 M −1 см −1 при 795 нм) 41 и Mito-CCy (1.55 × 10 5 M −1 см −1 при 734 нм) 42 , что указывает на то, что Nano-BFF является многообещающим фотопоглощающим агентом для достижения фотонной гипертермии под визуализацией PA в биологическом окне NIR-II (дополнительное Рис.9).

Фототермическая стабильность и устойчивость к фотообесцвечиванию / агрессивным агентам имеют решающее значение для PA / фототермических характеристик in vitro и in vivo. Таким образом, мы оценили фотостабильность BFF, Nano-BFF, клинически используемых индоцианиновых зеленых (ICG) и наностержней Au (Au NR) при лазерном облучении NIR-I или NIR-II.Поглощение ICG упало примерно до нуля после многократного облучения лазером NIR-I в течение 7 мин. Кроме того, очевидное уменьшение и синий сдвиг можно было наблюдать в характеристической полосе НК Au из-за значительной агрегации НК Au при непрерывном облучении лазером NIR-I (дополнительный рис. 10). Напротив, спектры поглощения BFF и Nano-BFF практически не изменились в течение периода облучения лазером NIR-I (дополнительный рис. 11b – d, f). В частности, лазерное излучение NIR-II оказало незначительное влияние на оптические свойства Nano-BFF (дополнительный рис.11д, е). Соответственно, цвета BFF и Nano-BFF были идентичны их исходным состояниям после многократного облучения лазером NIR-I или NIR-II в течение 7 мин, тогда как цвет водного раствора ICG постепенно менялся с зеленого на желто-зеленый при тех же условиях. (Дополнительный рис. 11а). Кроме того, мы исследовали устойчивость водного раствора Nano-BFF и ICG к фотообесцвечиванию с помощью альтернативного процесса нагрева и охлаждения. Характеристики фототермического преобразования Nano-BFF показали незначительные изменения после трех циклов процессов нагрева / охлаждения, тогда как повышение температуры раствора ICG значительно снизилось до ~ 15% (ΔT = 5 ° C) от исходного значения (ΔT = 33 ° C). ) после трех циклов облучения, демонстрируя, что Nano-BFF имеет более высокую устойчивость к фотообесцвечиванию, что резко контрастирует с клинически используемым ICG (дополнительный рис.11г, в). Кроме того, был проведен DLS-анализ для оценки стабильности Nano-BFF в кислых физиологических условиях. Размер частиц Nano-BFF при pH 5,5 и pH 6,5 оставался стабильным без явной агрегации в течение 24 часов, что свидетельствует о высокой стабильности Nano-BFF в кислой микросреде опухоли (дополнительный рисунок 12). Чтобы оценить физиологическую стабильность Nano-BFF против агрессивных агентов, мы затем записали спектры поглощения ICG, BFF и Nano-BFF в отсутствие и в присутствии двух типов реакционноспособных молекул, гидроксильного радикала (• OH) и гипохлорит-иона ( ClO ).Поглощение ICG при 780 нм упало на ~ 87% и 95% по сравнению с исходными значениями после добавления • OH и ClO , соответственно. В отличие от этого, в спектрах поглощения BFF и Nano-BFF наблюдались незначительные изменения в присутствии • OH и ClO (дополнительный рис. 13a – d), что свидетельствует о том, что они обладают высокой устойчивостью к окислению реактивными молекулами. Таким образом, Nano-BFF может служить ультрастабильным фототераностическим агентом для лечения заболеваний под контролем PA-визуализации даже в присутствии некоторых реактивных молекул.

Показатели фотонной гипертермии in vitro для Nano-BFF

Вдохновленные интенсивным поглощением Nano-BFF в биокнах как NIR-I, так и NIR-II, мы использовали эффективность фототермического преобразования Nano-BFF при длине волны 808 нм и 1064 нм. нм лазерное воздействие. При изменении плотности мощности лазера от 0,5 до 1,5 Вт / см −2 наблюдалось значительное повышение температуры (рис. 2a, e). Температура водного раствора Nano-BFF (200 мкг / мл -1 ) может быстро достигать 63 ° C и 61 ° C при длине волны 808 нм (1.5 Вт · см −2 ) и 1064 нм (1,5 Вт · см −2 ) в течение 5 мин соответственно (дополнительный рис. 14a, b). Кроме того, температура раствора Nano-BFF при различных концентрациях отслеживалась с помощью инфракрасных (ИК) тепловизионных изображений, а повышение температуры зависело как от продолжительности облучения, так и от дозы (рис. 2b, f), в то время как приращение температуры было незначительным. обнаружен для деионизированной воды в тех же условиях (дополнительный рис. 14c, d). Впоследствии было определено, что эффективность фототермического преобразования Nano-BFF составила 28.6% и 34,3% при 808 нм и 1064 нм соответственно (рис. 2c, g), что значительно выше, чем у различных фототермических агентов (например, ICG 3,1% 42 , IR1048-MZ 20,2% 43 , и Au NR 21% 44 ). Эти открытия прямо доказали, что Nano-BFF может эффективно и быстро преобразовывать фотоэнергию в тепло под действием лазерного излучения. Чтобы оценить фототермическую стабильность Nano-BFF, были записаны профили повышения температуры водного раствора Nano-BFF при шести циклах процессов нагрева и охлаждения.Поведение раствора при нагревании не выявило значительного ухудшения во время каждого цикла теста, что указывает на то, что Nano-BFF можно использовать в качестве долговечного фотопоглощающего агента для фотонной гипертермии рака в биологическом окне NIR-II (рис. 2d, h).

Рис. 2: Показатели преобразования фото-энергии в тепловую энергию Nano-BFF.

a , e Кривые фототермического преобразования водного раствора Nano-BFF (200 мкг / мл -1 ) при a 808 нм и e 1064 нм лазерном облучении при различных плотностях мощности. b , f ИК тепловые изображения водного раствора Nano-BFF при различных концентрациях под лазером b 808 нм (1,5 Вт см −2 ) и f 1064 нм (1,5 Вт см −2 ) облучение. c , g Фототермический эффект водного раствора Nano-BFF после облучения лазерами c 808 нм и g 1064 нм и линейные подгоночные кривые между временем и −lnθ, полученные в процессе охлаждения. d , h Двухпозиционные кривые водного раствора Nano-BFF (100 мкг мл -1 ) при d 808 нм (1.5 Вт · см −2 ) и · 1064 нм (1,5 Вт · см −2 ). i , j Плотность мощности лазеров i 808 нм и j 1064 нм после проникновения через ткани различной толщины. k Температура в реальном времени и l изменения температуры водного раствора Nano-BFF при лазерном облучении после проникновения в ткани с увеличением толщины кожи.

Для оценки способности лазеров NIR-I и NIR-II проникать в глубокие ткани, плотность мощности лазера 808 нм или 1064 нм после проникновения в ткань куриной грудки с увеличивающейся толщиной (2, 4, 6, 8 , и 10 мм) контролировали измерителем оптической мощности (рис.2i, j). По сравнению с лазером с длиной волны 1064 нм, остаточная плотность мощности лазера с длиной волны 808 нм ослабляется быстрее на каждой глубине ткани. Например, после проникновения через 2 мм ткани куриной грудки, остаточная плотность мощности для лазеров с длиной волны 1064 нм и 808 нм была определена как 0,9 Вт см −2 и 0,6 Вт см −2 при той же исходной плотности мощности. , соответственно. Эта разница способствовала лучшему пропусканию и более высокому MPE лазера 1064 нм по сравнению с лазером 808 нм 45,46,47 .Для дополнительной проверки более высоких характеристик фототермического нагрева глубоких тканей лазера NIR-II раствор Nano-BFF облучали лазером с длиной волны 1064 нм или 808 нм при различной толщине ткани (рис. 2k, l). Приращение температуры раствора Nano-BFF, облученного 1064 нм с глубиной проникновения 2 мм, достигло 17,9 ° C, что было выше, чем 12,8 ° C для лазера с длиной волны 808 нм при тех же условиях (дополнительный рис. 14e, f), объясняется более заметной способностью проникновения в глубокие ткани вместе с более высоким пределом MPE лазера 1064 нм по сравнению с лазером 808 нм.

In vitro фотонная гипертермия Nano-BFF против раковых клеток

Учитывая желаемые характеристики фотонного преобразования Nano-BFF, мы затем оценили его эффективность фототермической терапии (PTT) in vitro против раковых клеток (рис. 3a). Внутриклеточное поглощение Nano-BFF в различные моменты времени оценивали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (CLSM) с использованием меченного цианином 3 (Cy3) Nano-BFF (фиг. 3b). Изображения CLSM подтвердили, что Nano-BFF может эффективно интернализоваться в клетки 4T1, что наблюдается по красной флуоресценции, происходящей от Cy3-меченного Nano-BFF после 2 ч инкубации.Интенсивность флуоресценции Cy3, исходящей от Nano-BFF, продолжала увеличиваться до 12 часов, дополнительно подтверждая, что степень внутриклеточного поглощения увеличивается с увеличением времени инкубации. Впоследствии темновую цитотоксичность Nano-BFF изучали с помощью набора для подсчета клеток-8 (CCK-8) после инкубации с возрастающими дозами Nano-BFF в течение 24 и 48 часов соответственно. Nano-BFF не вызывал заметного снижения выживаемости клеток после инкубации в течение 48 ч даже при максимальной дозе 200 мкг / мл -1 , что доказывает его высокую биосовместимость с клетками 4T1 и MCF-7 (рис.3c и дополнительный рис. 15a). Эффективность Нано-BFF in vitro PTT исследовали с использованием клеток 4T1 в качестве модельной клеточной линии. Лазерное облучение или инкубация Nano-BFF при определенных условиях оказывала незначительное влияние на выживаемость клеток (дополнительный рисунок 15b). Эффект PTT, вызванный нано-BFF, сильно зависит от его дозировки. Например, когда доза Nano-BFF была увеличена до 200 мкг / мл -1 , ~ 90% клеток 4T1 подверглись термической абляции под воздействием как NIR-I, так и NIR-II лазерного облучения, что свидетельствует о выдающихся характеристиках фототермического преобразования Nano. -BFF способствует гибели опухолевых клеток (рис.3г, д). Между тем, эффективность PTT Nano-BFF также оценивалась с помощью анализа ацетоксиметилового эфира кальцеина / йодида пропидия (кальцеин-AM / PI). В группах лечения с использованием PBS, Nano-BFF, NIR-I лазера и NIR-II лазера почти все клетки показали интенсивную зеленую флуоресценцию, что указывает на незначительный повреждающий эффект от введения Nano-BFF и лазерного освещения на раковые клетки при определенных условиях. условия. Напротив, ярко-красная флуоресценция, очевидно, наблюдалась в группах лечения лазером Nano-BFF + NIR-I и лазером Nano-BFF + NIR-II, что доказывает превосходную фототермическую способность Nano-BFF как в биологическом окне NIR-I, так и в NIR-II. (Рисунок.3е).

Рис. 3. Внутриклеточное поглощение и фотонная гипертермия in vitro Nano-BFF.

a Схема лечения РТТ in vitro с помощью Nano-BFF. b Конфокальные изображения клеток 4T1, которым вводили Cy3-меченный Nano-BFF в различные моменты времени (масштабные полосы: 50 мкм). c Показатели выживаемости клеток 4T1, которым вводили Nano-BFF в повышенных дозах в течение 24 и 48 часов ( n = 5 биологически независимых образцов). d , e Показатели выживаемости клеток 4T1, обработанных различными концентрациями Nano-BFF под воздействием лазера d 808 нм и e 1064 нм в течение 10 мин ( n = 5 биологически независимых образцов).Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. n.s .: не имеет значения. p > 0,05; * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001, проанализировано с помощью двустороннего теста Стьюдента. f , g Флуоресцентные изображения клеток 4T1 после обработки различными препаратами. Клетки окрашивали f кальцеин-AM / PI (масштабные полосы: 100 мкм) и g DAPI / iFluor 488 (масштабные полосы: 20 мкм) перед анализом с помощью CLSM. ч 1–8 Профили апоптоза клеток 4T1 после обработки различными препаратами (I: PBS; II: NIR-I лазер; III: NIR-II лазер; IV: Nano-BFF; V: Nano-BFF. + NIR-I лазер; VI: Nano-BFF + NIR-II лазер).

Эффект PTT Nano-BFF был затем подтвержден путем характеристики морфологического изменения актиновых филаментов. Хорошо организованные стрессовые волокна с полимеризованной и стабильной структурой были четко визуализированы в группах лечения PBS, Nano-BFF, лазером NIR-I или лазером NIR-II. В группах, получавших Nano-BFF + NIR-I или Nano-BFF + NIR-II лазер, каркас актиновой нити сильно деформировался, что позволяет предположить, что нагревательный эффект Nano-BFF может значительно повредить полимеризацию актиновой нити (рис.3г). Анализ апоптоза клеток 4T1 из различных групп обработки проводили для количественного исследования апоптоза клеток, вызванного фотонной гипертермией. Лазерное облучение или введение Nano-BFF в определенных условиях приводило к незначительному апоптозу, тогда как группы, получавшие Nano-BFF с последующим лазерным облучением NIR-I и NIR-II, вызывали приблизительно 91,4% и 94,5% апоптотических клеток, соответственно, что указывает на то, что NIR -индуцированный фототермический эффект Nano-BFF приводил к гибели клеток преимущественно за счет апоптоза, а не некроза (рис.3h и дополнительный рис.16).

Биобезопасность in vivo и PA-визуализация Nano-BFF

Токсичность Nano-BFF in vivo была оценена с целью изучения его биобезопасности для потенциальных клинических применений. Примечательно, что не было заметной разницы между группой, получавшей PBS, и группой, получавшей Nano-BFF, по всем индексам крови, демонстрируя, что Nano-BFF не оказал отрицательного влияния на биохимию крови (дополнительный рис. 17a-p и дополнительное примечание 1). ). Кроме того, окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) основных органов мышей не показало очевидного сигнала повреждения ткани или воспаления во всех группах лечения, что дополнительно подтверждает превосходную биосовместимость разработанного Nano-BFF (дополнительный рис.17q). Кроме того, кровообращение Nano-BFF in vivo исследовали путем мониторинга концентрации Nano-BFF в крови в различные моменты времени после внутривенного введения. Концентрация Nano-BFF быстро снижалась на начальной стадии, и рассчитанный период полураспада Nano-BFF составил 1,41 ч, что указывает на его превосходные фармакокинетические характеристики in vivo (рис. 4a). Кроме того, был проведен анализ биораспределения in vivo для оценки накопления Nano-BFF в основных органах и тканях опухоли в различные моменты времени после инъекции.Дополнительный рис. 18 иллюстрирует, что Nano-BFF в основном распределяется в тканях печени мышей. Накопление Nano-BFF на участках опухоли было относительно высоким с количествами 4,46% ID g -1 через 4 часа и 8,57% ID g -1 через 12 часов, соответственно, что следует приписать типичному усиленному эффект проницаемости и удержания, а также увеличенное время циркуляции крови Nano-BFF.

Рис. 4: Фармакокинетический анализ in vivo и визуализация Nano-BFF с помощью PA.

a Профиль кровообращения Nano-BFF после внутривенного введения ( n = 3 биологически независимых образца).Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. b , c PA изображения Nano-BFF при возбуждении при b 900 нм и c 1200 нм при различных концентрациях. d , e График амплитуд PA с использованием Nano-BFF при d 900 нм и e 1200 нм в зависимости от дозы Nano-BFF. f h In vivo PA изображения опухолей в биологическом окне f NIR-I и h NIR-II, а также g соответствующие значения PA после внутривенной инъекции Nano-BFF (20 мг / кг −1 ) в разные моменты времени.

Благодаря выдающимся характеристикам фотонной гипертермии Nano-BFF как в биокнах NIR-I, так и NIR-II, было записано изображение PA in vitro для Nano-BFF при различных концентрациях (рис. 4b, c). Наблюдалась хорошая линейность между интенсивностью сигнала PA и дозой Nano-BFF при 900 и 1200 нм, что указывает на желаемую возможность визуализации PA Nano-BFF как в биокнах NIR-I, так и NIR-II (рис. 4d, e) . Кроме того, эффективность визуализации PA in vivo для различных доз Nano-BFF была исследована путем записи сигналов PA на участках опухоли через различные интервалы времени после инъекции.Постепенно увеличивающиеся PA-сигналы Nano-BFF в областях опухоли как в биологическом окне NIR-I, так и в NIR-II наблюдались при увеличении времени инкубации, а максимальная интенсивность сигнала была обнаружена через 12 часов после инъекции из-за зависящего от времени накопления Нано-BFF на участках опухоли в течение 12 часов и его последующее влияние на микроокружение опухоли (рис. 4f – h, дополнительный рисунок 19 и дополнительное примечание 2). Желательная возможность получения изображений PA in vivo указывает на возможность использования Nano-BFF в качестве контрастного агента для лечения рака под контролем изображений PA.

Фотонная гипертермия опухоли in vivo в биологическом окне NIR-II на основе Nano-BFF

Вдохновленный превосходной способностью фотонной гипертермии in vitro Nano-BFF, была исследована его эффективность фотонной гипертермии in vivo (рис. 5a). Мыши с опухолями 4T1 были случайным образом разделены на шесть групп, включая группу I: PBS (контроль), группу II: лазер NIR-I, группу III: лазер NIR-II, группу IV: Nano-BFF, группу V: Nano-BFF. + NIR-I лазер и группа VI: Nano-BFF + NIR-II лазер.Опухоли облучали лазером NIR-I или NIR-II в течение 10 мин через 12 ч после инъекции. Инфракрасная тепловизионная камера использовалась для наблюдения за тепловизионным изображением и температурой областей опухоли в реальном времени после лазерного воздействия. У мышей, которым вводили Nano-BFF, температура на участках опухоли быстро увеличивалась на 18,4 ° C и 19,8 ° C в течение первых 6 минут, а затем поддерживалась на уровне 55,8 ° C и 57,5 ​​° C в течение 10 минут после NIR-I и NIR- II соответственно (рис. 5б, в). Для сравнения, при облучении лазерами NIR-I и NIR-II температура опухолей в группе PBS немного повысилась, а конечная температура достигла 43 ° C.2 ° C и 44,1 ° C соответственно, демонстрируя, что Nano-BFF способен значительно повышать локальную температуру опухоли при облучении NIR в биокнах NIR-I и NIR-II. Для оценки эффективности фототермической абляции in vivo контролировали относительные объемы опухолей мышей, получавших различные виды лечения (фиг. 5d и дополнительный фиг. 20). Фототермическое лечение, опосредованное нано-BFF, в биокнах как NIR-I, так и NIR-II привело к полному уничтожению опухоли со 100% выживаемостью, и в течение периода наблюдения в 40 дней не наблюдалось повторного роста опухоли, что подтверждает, что Nano-BFF может заметно подавлять рост опухоли под воздействием лазерного излучения (рис.5f – i). Напротив, инъекция PBS, только облучение NIR-лазером или введение Nano-BFF без лазерного облучения не оказали значительного влияния на подавление опухоли (рис. 5f-h). Кроме того, эти методы лечения не влияли на массу тела мышей с опухолями, что позволяет предположить, что фототермическое лечение, индуцированное Nano-BFF, обеспечивает высокую терапевтическую биобезопасность (рис. 5e). Репрезентативные изображения H&E основных органов показали незначительное патологическое повреждение или воспалительные сигналы в течение всего периода лечения, а также продемонстрировали незначительный неблагоприятный эффект Nano-BFF на нормальные ткани (дополнительный рис.21).

Рис. 5: Фотонная гипертермия опухоли in vivo на основе Nano-BFF в биокнах NIR-I и NIR-II.

a Схема гипертермии фотонного рака, вызванной Nano-BFF. b ИК-тепловизионных изображений и c изменения температуры опухоли у мышей в разных группах лечения (лазер NIR-I, лазер NIR-II, лазер Nano-BFF + NIR-I и лазер Nano-BFF + NIR-II. ) ( n = 6 биологически независимых образцов). d Относительные объемы опухоли, e вариации массы тела мышей, f веса опухоли и g скорости роста опухоли у мышей с опухолью 4T1 после различных обработок ( n = 6 биологически независимых образцов). ч Репрезентативные фотографии рассеченных опухолей и показателей выживаемости мышей с опухолями 4T1 после различного лечения. Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. n.s .: не имеет значения. p > 0,05; * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001, проанализировано с помощью двустороннего теста Стьюдента. j Иммунофлуоресцентное окрашивание опухолевых тканей H&E, TUNEL и Ki-67 после различных процедур (I: PBS; II: NIR-I лазер; III: NIR-II лазер; IV: Nano-BFF; V: Nano-BFF. + NIR-I лазер; VI: Nano-BFF + NIR-II лазер).Масштабные линейки: 50 мкм. Показано репрезентативное изображение трех биологических повторов из каждой группы.

Для проверки противоопухолевого механизма Nano-BFF при лазерном облучении (808 нм или 1064 нм) окрашивание H&E и терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы уридинтрифосфат-ник-концом (TUNEL) окрашивали через 24 часа после различных обработок. Тяжелый некроз / апоптоз опухолевых клеток был обнаружен для групп Nano-BFF + NIR-I лазер и Nano-BFF + NIR-II лазер, тогда как другие четыре группы (PBS, NIR-I лазер, NIR-II лазер и Nano-BFF). ) выявили незначительное повреждение опухолевых клеток (рис.5j). Кроме того, пролиферативная активность in vivo различных групп лечения оценивалась с помощью анализа окрашивания антителом Ki-67. При заметном сравнении с группами, получавшими PBS, NIR-I лазер, NIR-II лазер и Nano-BFF, интеграция Nano-BFF с NIR-I лазером или NIR-II лазером показала существенное ингибирование пролиферативной активности опухолевых клеток. (Рис. 5j).

Кроме того, была создана иммунокомпетентная модель мыши BALB / c, несущая опухоль 4T1, для оценки фотонного гипертермического эффекта Nano-BFF in vivo.Результаты дополнительно подтвердили заметную PTT-эффективность Nano-BFF in vivo (дополнительные рисунки 22 и 23 и дополнительное примечание 3). Кроме того, также оценивалась противоопухолевая эффективность нано-BFF в различных дозах in vivo. Как показано на дополнительном рисунке 24 (дополнительное примечание 4), после воздействия лазерного излучения NIR-II температура опухоли увеличилась на 14,1 и 17,2 ° C при инъекционных дозах 5 и 10 мг / кг -1 соответственно, что указывает на отличную эффект гипертермии от Nano-BFF при облучении лазером NIR-II.Важно отметить, что Nano-BFF (5 мг кг -1 ) плюс лазерное воздействие NIR-II вызывало очевидное подавление опухоли со скоростью роста опухоли 67,6%. Полное удаление опухоли без дальнейшего рецидива наблюдали у мышей, получавших введение Nano-BFF (10 мг кг -1 ) и облучение лазером NIR-II. Эти результаты подтвердили, что Nano-BFF может служить эффективным фототермическим агентом с превосходной биосовместимостью.

In vivo фотонная гипертермия опухоли в глубоких тканях в биокне NIR-II на основе Nano-BFF

Для подтверждения превосходства биокна NIR-II над биокном NIR-I для in vivo фотонной гипертермии опухоли в глубоких тканях, Nano -BFF вводили внутривенно голым мышам с опухолями 4T1, а затем проводили лазерное воздействие путем проникновения через 4 мм ткани куриной груди для имитации окружения глубоких тканей (рис.6а). После воздействия лазерного излучения NIR-II температура опухоли у мышей, которым вводили Nano-BFF, достигала 52 ° C (рис. 6b, c), что было заметно выше, чем у мышей, которым вводили Nano-BFF, облученных NIR-фильтром. I (45 ° C) и мышей, получавших PBS, подвергшихся облучению лазером NIR-II (42 ° C). Соответственно, рост опухоли у мышей, которым вводили Nano-BFF, был успешно подавлен на протяжении всего периода наблюдения, и опухоли были полностью удалены на 6-й день после лазерного облучения NIR-II.В противоположность этому, опухоли мышей, получавших Nano-BFF и NIR-I лазер в одинаковых условиях, быстро росли, как и у мышей, которым вводили PBS (фиг. 6d, e). Более того, гораздо более высокая терапевтическая эффективность нано-BFF в глубоких тканях биокна NIR-II по сравнению с биокном NIR-I была подтверждена окрашиванием H&E, TUNNEL и Ki-67 (рис. 6g). Кроме того, для всех групп лечения не наблюдались существенные вариации веса мышей и отсутствие сигнала повреждения основных органов мышей, что свидетельствует о высокой биобезопасности введения Nano-BFF и лазерного облучения (рис.6е, з).

Рис. 6: In vivo фотонная гипертермия опухоли глубоких тканей Nano-BFF в биологическом окне NIR-II.

a Схематическая интерпретация глубокой тканевой фотонной гипертермии рака с использованием Nano-BFF. b тепловые изображения и c температурные профили в областях опухоли мышей-опухоленосителей в различных группах лечения после проникновения через 4 мм ткани грудной клетки курицы ( n = 5 биологически независимых образцов). d Относительные объемы опухоли, e скорости роста опухоли и f вариации массы тела мышей в различных группах лечения ( n = 5 биологически независимых образцов).Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. n.s .: не имеет значения. p > 0,05; * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001, проанализировано с помощью двустороннего теста Стьюдента. г Репрезентативные фотографии мышей и соответствующее окрашивание опухолевых тканей антителами H&E, TUNEL и Ki-67 после различных обработок (масштабные полосы: 50 мкм). ч. H&E окрашивание основных органов из различных групп лечения (I: PBS; II: Nano-BFF + NIR-I лазер; III: Nano-BFF + NIR-II лазер, глубина проникновения: 4 мм).Масштабные линейки: 100 мкм. Показано репрезентативное изображение трех биологических повторов из каждой группы.

Основываясь на отличном накоплении Nano-BFF в тканях печени мышей и способности глубокого проникновения лазера NIR-II, была создана ортотопическая модель HCC для подтверждения терапевтической эффективности нано-BFF в глубоких тканях in vivo в условиях NIR. -II лазерное облучение. Мышей с опухолями с однородными сигналами биолюминесценции случайным образом разделили на четыре группы, включая PBS (контроль), Nano-BFF, Nano-BFF + NIR-I лазер и Nano-BFF + NIR-II лазер.Объемы опухолей мышей исследовали с помощью биолюминесцентной визуализации in vivo (рис. 7а). По сравнению с группами лазеров PBS, Nano-BFF и Nano-BFF + NIR-I, группа лазеров Nano-BFF + NIR-II продемонстрировала значительно более сильный подавляющий эффект на пролиферацию ортотопических опухолей печени у мышей (рис. 7b– е). Опухоли в группе лазера Nano-BFF + NIR-II имели минимальные объемы среди всех групп лечения, что соответствовало результатам биолюминесцентной визуализации in vivo (фиг. 7h).Противоопухолевые свойства дополнительно оценивали с помощью окрашивания репрезентативных опухолевых тканей H&E, TUNEL и Ki-67. Наибольшая область апоптоза / некроза и наименьшая пролиферация были обнаружены в опухолевых тканях мышей, получавших введение Nano-BFF и последующее лазерное облучение NIR-II, но никаких явных повреждений и апоптоза не наблюдалось в нормальных тканях печени (рис. 7i). ). Между тем, в каждой группе лечения можно было наблюдать незначительную потерю массы тела, что подтвердило, что Nano-BFF не имеет очевидной токсичности для здоровья мышей (рис.7г). Кроме того, окрашивание H&E основных органов не показало признаков токсичности in vivo (дополнительный рисунок 25). Эти результаты продемонстрировали, что Nano-BFF обеспечивает эффективный эффект гипертермии при лазерном облучении NIR-II для удаления глубоко расположенных опухолей.

Фиг. 7. Противоопухолевые свойства Nano-BFF в отношении ортотопической ГЦК in vivo.

a Биолюминесцентные изображения мышей, получавших PBS, Nano-BFF, Nano-BFF + NIR-I лазер и Nano-BFF + NIR-II лазер в дни 0, 4, 8, 12, 16 и 20 соответственно ( n = 5 биологически независимых образцов). b e Относительные уровни ортотопической люминесценции опухоли печени у мышей после различных обработок, включая b PBS, c Nano-BFF, d Nano-BFF + NIR-I лазер и e Nano- Лазер BFF + NIR-II. f Относительные уровни ортотопической люминесценции опухоли печени у мышей и г вариации массы тела мышей в различных группах лечения в течение 20 дней ( n = 5 биологически независимых образцов).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *